多巴胺(DA)ELISA试剂盒的应用原理是怎样的？

　　多巴胺(DA)ELISA试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定其他血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中多巴胺(DA)ELISA试剂盒含量。将多巴胺(DA)抗体包被于孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的多巴胺(DA)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的多巴胺(DA)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的多巴胺(DA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值，计算样品浓度。
 

　　

　　多巴胺(DA)ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用，产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。

　　

　　多巴胺(DA)ELISA试剂盒使用注意事项：

　　

　　1、从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

　　

　　2、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

　　

　　3、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

　　

　　4、为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

　　

　　5、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

　　

　　6、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。