猪（3α-HSD）试剂盒（ELISA）

产品简介：

样本类型：血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本

检测方法：双抗夹心法

储藏及保存：2-8度，6个月

检测原理：

将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次*洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

产品内容：

实验所需仪器及设备：

实验操作流程：

第一步：试剂盒室温平衡 30min ，然后从铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

第二步：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL。

第三步：样本孔中加入待测样本 50μL；空白孔不加。

第四步：除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

第五步：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。

第六步：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

第七步：每孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 O.D 值。

注：

猪（3α-HSD）试剂盒（ELISA）

仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

为了帮助您更好地解决在实验中可能碰到的各种问题，我们设计了这些问题指导，配以试剂盒内的说明书一起供您参考使用。很多因素都将导致免疫测定实验的失败，而大多数技术失误是可以通过全面阅读和准确理解说明书以及实验步骤来避免的。若对试剂盒内的说明书有任何意见和建议，欢迎反馈。我们期待听到您的声音，从而完善我们的产品，更好地为您服务。
◆ 仔细阅读说明书
◆ 检查试剂盒标签上的有效期。如果超过有效期，请勿使用。
◆ 按说明书确定所有试剂齐全（数量、体积）
◆ 标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。
短期内无法实验者，注意低温保存
◆ 准备好所有实验额外所需物品， （比如移液器，试管，清洗器， 酶标仪）
◆ 按说明书将所用试剂平衡至室温，根据检测标本数量确定所需试剂的量
◆ 检查试剂盒内每种试剂的贮存条件，保证所有试剂均按照试剂盒内说明书推荐的条件存储。
◆ 检查不稳定或者变质的试剂溶液（比如沉淀或变色）。有些试剂，比如标准品稀释液或者检测稀释液，可能在设计时就含有沉淀物。所有试剂在滴入酶标板之前，必需充分混匀。而由于沉淀物的特性，在加入酶标板之前，必需不停搅拌。
◆ 保证充分的孵育时间和温度。
◆ 切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。
◆ 在混合或溶解蛋白溶液时，避免泡沫产生。
◆ 在实验开始之前，安排好实验流程。
◆ 在实验开始之前，清洁工作台。
◆ 若有问题，应与我公司或代理商进行沟通。