牛乙酰（acetylCoA）ELISA试剂盒

 牛乙酰（acetylCoA）ELISA试剂盒

✦产品信息

【用途】

该试剂盒采用“一步"夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中acetylCoA 浓度。

【检测原理】

将目标抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，将未结合的抗体洗净后再次*洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

【产品内容】

【特异性】

可检测样本中的acetylCoA , 且与其它类似物无明显交叉反应。

【重复性】

板内，板间变异系数均<10%

【批内差】

取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

【批间差】

选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

【精密度】

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批间差: CV<13%

【稳定性】

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。 为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

 牛乙酰（acetylCoA）ELISA试剂盒

✦实验所需自备物品

1、450±10nm滤光片酶标仪（建议仪器使用前预热）  

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.  

3、Eppendorf 移液器.    

4、蒸馏水或去离子水.    

5、脱脂棉吸水纸.  

6、37℃恒温箱.    

7、100ml和1000ml量筒.

影响ELISA试剂盒曲线的因素

一 OD值不正常的可能原因是：

1、试剂盒未回温，试剂盒回温到25℃；

2、温度控制不好，控制正确温度；

3、孵育时间不准确，控制孵育时间；

4、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加，洗涤4-5次，每孔250ul，然后拍干；

5、阳光直射，对着风直接吹，避风避光；

6、酶标仪的波长错误，酶标仪的波长450nm；

7、抗体的稀释错误，正确的稀释抗体；

8、水质问题，用娃哈哈矿泉水代替。

二 白板的可能原因是：

1、洗涤液配制错误，正确的配制洗涤液；

2、少加液体（错加液体），正确的步骤加液体。

三 无梯度可能原因是：

1、标准品也污染，换标准品点板；

2、OD值不正常，控制温度时间在做一次；

3、人为点板，不要点板。

四 线性不好可能原因是：

OD值不正常，控制温度时间在做一次。